产品货号:
KD2105
中文名称:
聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒
英文名称:
Polyacrylamide gel DNA Recovery Kit
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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产品内容:
产品说明:
本试剂盒适用于从PAGE凝胶中回收DNA片段和Oligo的产品。适用于回收100bp以下的双链DNA片段,包括长度在20nt左右的单链DNA(Oligo)。
操作步骤:
1.进行PAGE电泳,电泳后染色观察DNA并确定要回收的DNA的条带位置。
2.小心切取含DNA片段的PAGE凝胶。尽可能切去多余的凝胶,凝胶重量控制在0.3g以下。
注意:如果胶孔大,胶体积大,需要按比例增加试剂的用量。
3.将凝胶块转移到1.5mL的离心管中,用枪头或者微型研磨棒充分捣碎。
4.在破碎的凝胶中加入0.3mL的裂解液I,将离心管水平放置于摇床上摇晃1~10个小时。如果DNA片段小于100bp,摇晃3个小时足够;如果片段大小大于300bp,可以过夜摇晃。
5.12000rmp/min离心3min,小心吸取上清到另一个1.5mL离心管中,并在沉淀中重新加入0.2mL的裂解液I,充分吹打沉淀。
6.12000rmp/min离心3min,小心吸取上清加入上步所得的上清中(共0.5mL)。
7.在上清液中加入1mL(2倍体积)的沉淀液II,充分颠倒混匀(-20℃静置30min有助于DNA的沉淀)。
8.12000rmp/min离心15min,小心吸弃上清。
9.在沉淀中加入1mL的洗涤液III,重悬沉淀。12000rmp/min离心5min,小心吸弃上清。
10.晾干,加入合适体积的TE(>30μL)溶解DNA沉淀。
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